BAÑO MARÍA

El mismo 25 de noviembre, nuestra profesora nos explicó un poco sobre el baño maría, así como realizamos una práctica de manera grupal:

El baño de María es un equipo que se utiliza en el laboratorio para realizar pruebas serológicas y procedimientos de incubación, aglutinación, inactivación, biomédicos, farmacéuticos y hasta industriales. Por lo general, se utilizan con agua, pero también permiten trabajar con aceite. Los rangos de temperatura en los cuales normalmente son utilizados están entre la temperatura ambiente y los 60 °C. También se pueden seleccionar temperaturas de 100 °C, utilizando una tapa de características especiales. Los baños de María son fabricados con cámaras cuya capacidad puede seleccionarse entre los 2 y los 30 litros.

Esquema de un baño maría

MATERIALES:

• Clara de huevo
• Tubo de ensaye
• Pipeta
• Baño maría

PROCEDIMIENTO

1. Se extrae la muestra de clara con la pipeta y se vacia en el tuvo de ensaye.
2. Se abre el baño maría y se coloca el tubo en la gradilla.
3. Se conecta y se enciende el equipo, a 30°
4. Se coloca el termómetro y se deja reposar hasta 2hrs,

Nuestro equipo de baño maría

Se extrae la muestra

Se coloca el tubo de ensaye en la gradilla y esta se introduce en el equipo

La temperatura es a 30°

Se deja reposar durante hrs

ESTERILIZACIÓN (AUTOCLAVE Y ESTUFA DE SECADO)

El 25 de noviembre nuestra profesora nos compartió los siguientes conocimientos:

• Esterilización: Es la eliminación total de las bacterias. Generalmente usa dos equipos, autoclave y el horno.
• Las bacterias no se desarollan si no hay una condición como nutrientes o un buen pH.

• La esterilización se hace por vía: seca y húmeda.
• Por vía seca se usa el horno de secado por 2hrs a 180°. Se pueden esterilizar materiales de metal y vidrio.
• Por vía húmeda se usa la autoclave, durante 15min, la temperatura no es controlada, si no se controla la presión y se esterilizan medios de cultivo y material de vidrio.

MATERIALES:

• Cinta testigo
• Caja de petri
• Tijera
• Algodón
• Tubos de ensaye
• Matraz Enlermeyer
• Gradilla
• Papel estraza
• Apósitos

PROCEDIMIENTO

1. Preparar el matraz. Se hace un tapón con el apósito, se hace un gorrito con el papel estraza y se asegura con la cinta.
2. Llenar el autoclave de agua (destilada de preferencia) hasta la marca roja que tiene.
3. Verificar las condiciones de la camisa.
4. Introducir la bandeja o camisa con todo el material a esterilizar.
5. Cerrar y sellar en forma de cruz
6. Cerrar  o verificar que esté cerrada la válvula de escape.
7. Conectar y encender al máximo.
8. Cuando llegue la aguja a 1 en el manómetro, se cuentan 15 min, y se checa que no pase de 1 con la válvula de escape.
9. Pasados los 15min, se abre en su totalidad la válvula de escape y se espera 5min.
10. Se abre
11. Se saca la camisa con ayuda de la manigueta. Se abre el desagüe, se enjuaga y se seca.
12. Se sacan las muestras, se lava y se seca la camisa. Se guarda en el autoclave y éste se cierra y se guarda.

• La caja de petri se envuelve en papel estraza como se envuelven las tortillas, evitando tantas arrugas.
• El tubo de ensaye se va a envolver en una tira larga. Antes se le coloca un tapón de algodón (la torunda). Se comienza a enrollar, desde donde está la torunda hasta el final del tubo de ensaye, al final se asegura con un pequeño pedazo de cinta testigo. La pipeta es el mismo procedimiento.
• La torunda debe quedar muy apretada y se debe dejar un pedazo de fuera para poder tomarla cuando se saque la muestra.

MICROSCOPIA

 A partir del 28 de octubre hasta el 18 de noviembre, vimos muchos aspectos del microscopio. Les comparto mis notas u conocimiento:

Microscopio

El microscopio es un instrumento de observación que consta de sistemas: mecánico, iluminación, óptico y en algunos, electrónicos. La función del microscopio es hacer visible al ojo humano cosas que no lo son directamente. 

Por su estructura y funciones, el microscopio es usado en infinidad de campos, desde la medicina, que 

es en donde se ha destacado, como en la industria, botánica, farmacéutica, en la electrónica y la 

 cibernética, donde realizan estudios para crear nuevos micro componentes como los 

procesadores de las computadoras actuales. 

Partes del Microscopio

• Tubo
• Oculares
• Brazos
• Objetivos
• Platina
• Condensador
• Lámpara
• Diafragma 
• Revólver 
• Pie
• Tornillos macro y micro
• En algunos, Vernier, nonius o reglilla.

Sus funciones

• Objetivos: Sirven para enfocar las muestras y poder así observarlas. Por lo general son 4: 4x, 10x, 40x y 100x. Cada uno contiene una franja de color que los identifica. 4x, franja roja  y sirve para enfocar. 10x es amarilla y enfoca mejor los objetos. 40x es azul y nos permite ver la forma de la muestra. 100x, es necesario usar un aceite de inmsersión, su franja es blanca y nos permite ver claramente el objeto. Crean una imagen real e invertida.
• Oculares. Ubicados en la parte superior del tubo, su función es la de captar y ampliar la imagen.
• Tubo. Cámara oscura unida al brazo, contiene el revólver y los oculares.
• Brazo. Perpendicular al pie, une al pie con el tubo.
• Platina. Plataforma, permite el paso de la luz. Tiene pinzas para sostener el portaobjeto.
• Vernier o nonius. Son reglillas que se encuentran en la parte posterior de la platina y fijan las coordenadas de un campo óptico.
• Condensador. Concentra la luz y contiene un diafragma-iris.
• Diafragma. Limita el haz de la luz.
• Fuente de iluminación. Es una lámpara halógena de intensidad graduable.
• Pie. Base del microscopio, da estabilidad al microscopio.
• Tornillos: a) macrométrico. Mueve la platina y enfoca. b)micrométrico. Se mueve menos así que ayuda a enfocar mejor.

HISTORIA DEL MICROSCOPIO

Enfoque

1. La muestra se coloca en la platina (esta se debe de encontrar abajo).
2. Se enciende el microscopio y se regula la luz.
3. Debe estar el objetivo de 4x, se sube la platina con el macrométrico y se busca una imagen.
4. Comienza a enfocar con los tornillos, iniciando con el macrométrico hasta hallar una imagen, y con el micrométrico se enfoca mejor.
5. Una vez vista una imagen en 4x, se pasa el objetivo de 10x, se enfoca solo con el micrométrico.
6. Lo mismo para el de 40x.
7. Para el de 100x, se debe usar el aceite de inmersión.
8. Una vez terminada la observación, se procede al desenfoque y guardado.

Desenfoque y guardado

1. Dejar el objetivo de 4x
2. Bajar la platina
3. Quitar la muestra
4. Limpiar la lente si se usó aceite
5. Limpiar el portaobjetos con alcohol éter y un paño.
6. Dejar la luz en su nivel inferior
7. Apagar
8. Guardar

Tipos de extendidos

Temporales:

1. Si la muestra es un sólido, se hace un corte transversal, muy fino.
2. Se coloca la muestra en el portaobjetos, en medio, y se extiende con el asa de platino.
3. Se coloca una gota de agua, encima el cubreobjetos y se lleva a observar.
4. Una vez terminada la observación, se desecha la muestra y se limpian los materiales con alcohol éter.

Permanente:

1. Para evitar errores, se dibujar un círculo en medio del portaobjetos tomando en cuenta la medida del cubreobjetos.
2. Se coloca la muestra en el espacio delimitado por el círculo con ayuda del asa de platino o una pinza según sea el caso. Se le coloca una gota de agua y se tiñe según la muestra que se desea tener.
3. Se echa silicón a las orillas del cubreobjetos y se pega sobre el portaobjetos, permitiendo que el agua quede adentro. La muestra no debe ser muy gruesa para que así el silicón pegue y se conserve el agua y aire dentro del cubreobjetos.
4. Se deja secar, y se borra el círculo con ayuda de un cotonete y alcohol.

Tinción

Tinción de Gram

Tinción simple

Fotos de algunas de nuestras muestras

Esta es una muestra de nuestra profesora donde se observan cocos, bacilos, diplococos, estreptococos, entre otras bacterias.

Piel de cebolla en 4x

Piel de cebolla en 10x

Piel de cebolla en 40x

Cáscara de mandarina en 4x

Cáscara de mandarina en 10x

Tomate en 4x

Espinaca en 4x

Espinaca en 10x

Espinaca en 40x

                  

DECANTACIÓN

El 24 de octubre, realizamos esta práctica de manera grupal así como nuestra profa nos planteó un problema, aquí mis conocimientos:

Este método es utilizado para separar un sólido de grano grueso e insoluble mezclado con un líquido. Consiste en verter el componente líquido después de que se ha sedimentado el sólido. Este método también se aplica en la separación de dos líquidos que no se mezclan por sus diferentes densidades; en este caso se utiliza el embudo de separación.

MATERIALES:

• Miel, miel de maple, aceite, glicerina, agua y agua.
• Vaso de precipitado
• Agitador
• Soporte universal
• Embudo de decantación y pinza de sostén,

PROCEDIMIENTO

1. Se mezclaron todas las sustancias en el vaso de precipitado y se dejó reposar
2. Se vació la mezcla en el embudo de decantación
3. Observamos qué compuesto era más denso y separamos con ayuda de la llave que contiene el embudo.

La mezcla

Se vacía la mezcla en el embudo con ayuda del agitador

Proceso de decantación

PROBLEMA

Tenemos en un recipiente una mezcla con agua, sal, arcilla, arena y metal. Identifica en orden ascendente qué métodos se pueden aplicar para separar cada uno de los elementos que encuentran en la mezcla.

Yo lo resolví de la siguiente manera:

Metal -> Imantación

Arcilla -> Decantación

Arena -> Filtración

Sal -> Evaporización

MUESTRA DE SANGRE Y CENTRIFUGACIÓN

El 21 de octubre nuestra profesora nos explicó cómo debíamos tomar una muestra de sangre ya que emepezamos a ver el tema de la centrífuga, hoy les comparto esta información:

1. Limpiar la zona con alcohol 
   

2. Palpar la zona con el índice y el de en medio.

3. Colocar el liguero, sujetándolo en el antebrazo y que sea fácil de desatar.

4. Volver a explorar la zona elegida (zona de punción).

5. Preparar la jeringa, meter la aguja de manera transversal y hacia arriba. Tomar la muestra.

6. Antes de sacar la aguja, desatar la liga, sacarla y colocar algodón con alcohol en la punzada.

7. Indicarle al paciente que mantenga doblado su brazo para que corte la salida de sangre. Aproximadamente 10min.

CENTRIFUGACIÓN

El dia 24 de octubre, procedimos a la centrifugación, tomando la muestra de sangre de dos compañeros. A continuación un concepto:

La centrifugación consiste en someter la mezcla a un rápido movimiento giratorio, separando las sustancias por diferencia de densidades.

La operación se lleva a cabo por medio de un movimiento de traslación acelerado, se aumenta la fuerza gravitacional, provocando la sedimentación del sólido o de las partículas de mayor densidad. Los corpúsculos o el paquete globular de la sangre se separan por centrifugación en un suero. Algunas de sus aplicaciones industriales son:

Fabricación de azúcar. Separación de polímeros.

Separación de sustancias sólidas de la leche

Separación del plasma de la sangre. En análisis químicos y de laboratorio (sangre y orina).

MATERIALES:

• Centrífuga
• Tubos de ensaye
• Leche y sangre
• Gradilla
• Jeringa de 5ml

PROCEDIMIENTO:

1.- Se toma la muestra de sangre:

2.- Se colocan las muestras de leche y sangre en los tubos de ensaye. Deben estar a la misma altura. En nuestro caso, centrifugamos las muestras por separado. 

 Para la centrifugación de la sangre se ocupó otro tubo de ensaye con la misma cantidad de sustancia que la sangre, ya que al colocar los tubos en la centrífuga, se deben contraponer. Lo mismo que la leche:

3. Se colocaron los tubos de ensaye de forma contraponiente:

4. Se conectó la centrífuga y se programó el tiempo. Comenzamos la centrifugación en un lapso de 10min.

5. Terminado el lapso, se detuvo la centrífuga, se sacaron las muestras y observamos. Desconectamos y guardamos el equipo.

RESULTADOS

Sangre centrifugada

Leche centrifugada

CROMATOGRAFÍA EN PLAYERA

El día 20 de octubre, nuestra profesora nos explicó los pasos para llevar una cromatografía en playera:

MATERIALES:

• 1 playera (o cuantas se deseen teñir)
• Colorante para telas (como caballito o mariposa)
• Sal
• Bolsa de plástico

PROCEDIMIENTO:

1. En un recipiente con 1 litro de agua fría, se vierte el colorante y se mezcla bien con el agua. Se humedece (como si se estuviera amasando) la playera durante 15 minutos en el agua con el colorante.
2. Se saca la playera y se vierten 4 cucharadas de sal, se mezcla y se vuelve a humedecer la playera durante otros 15 min.
3. Pasado el tiempo, se saca y se escurre, se guarda en una bolsa de nylo durante 15 horas.
4. Pasado el tiempo, se saca la playera y se lava hasta que deje de salir colorante.
5. Se mete en un recipiente con detergente, al revés, y se lava durante 15 min.
6. Se enjuaga y se pone a secar en un gancho a la sombra.

La playera era blanca

Pasada por el proceso para teñirla

Unos de los pasos finales

RESULTADOS

La playera contiene un degradado, está mezclado con la técnica del uso crayolas para pintarla

La playera está teñida completamente, utilicé pinturas acrílicas para darle un estilo más personal y de frente la decoloré con cloro formando la palabra Queen

Dos playeras más, degradadas en negro, a una le costuré cadenas y a la otra le pinté el logo de Nirvana.

FILTRACIÓN SIMPLE (PRÁCTICA)

17-oct-2014

Este día, después de haber realizado la cromatografía de columna, procedimos a realizar la filtración, ya que es uno de los métodos de separación más fáciles y simples. Aquí un concepto:

La filtración permite separar un sólido insoluble de grano relativamente fino que esté mezclado con un líquido. Para tal operación se emplea un medio poroso de filtración o una membrana que deje pasar el líquido y retenga el sólido. Los filtros más comunes son: papel filtro, fibra de asbesto, algodón, fibra de vidrio, fibras vegetales, redes metálicas y cal.

En el siguiente link se encuentran los materiales y el procedimiento que realizamos: Planeación de prácticas

Aquí algunas imágenes, ya que por el tiempo, no grabé el procedimiento:

Esquema de una filtración, se observan los dobleces del papel filtro.

Mezcla de agua con arena

Mezcla de agua con azufre

RESULTADOS

Mezclas	Tiempo
Agua con azufre	13.47 min
Agua con arena	05.34 min

CROMATOGRAFÍA DE CAPA FINA Y DE COLUMNA (PRÁCTICAS)

(16 y 17 de octubre)

La cromatografía consiste en separar, con ayuda de solventes, mezclas de gases o líquidos al conducirlas a través de un medio poroso y adecuado. El equipo para tal operación puede ser tan simple como una columna rellena, un papel o una placa que contienen el medio poroso, o ien un equipo tan sofisticado como lo es un cromatógrafo.

Las planeaciones de las prácticas de las cromatografías la pueden encontrar aquí: Planeación

Cromatografía de capa fina

En la cromatografía en capa fina (CCF) la fase estacionaria consiste en una capa delgada de un adsorbente (como por ejemplo gel de sílice, alúmina o celulosa) depositada sobre un soporte plano como una placa de vidrio, o una lámina de aluminio o de plástico.

La CCF es una técnica analítica y tiene como objetivo el análisis de una mezcla de componentes. 
El proceso es similar a la cromatografía de papel con la ventaja de que se desarrolla más rápidamente, proporciona mejores separaciones y se puede elegir entre diferentes absorbentes. La CCF es una técnica estándar en el laboratorio de química orgánica. Debido a su simplicidad y velocidad, la CCF se utiliza a menudo para monitorizar las reacciones químicas y también para el análisis cualitativo de los productos de una reacción, puesto que permite conocer de manera rápida y sencilla cuántos componentes hay en una mezcla.

Aquí les dejo el link del video de nuestra práctica: Cromatografía de capa fina

Cromatografía de columna

Es una técnica de purificación, puesto que permite aislar los compuestos deseados de una mezcla.

La cromatografía en columna utiliza una columna de vidrio vertical que se llena con un soporte sólido adsorbente (fase estacionaria: los más utilizados son gel de sílice (SiO2) y alúmina (Al2O3).

 La muestra que se quiere separar se deposita en la parte superior de este soporte. El resto de la columna se llena con el eluyente (disolvente que constituye la fase móvil) que, por efecto de la gravedad, hace mover la muestra a través de la columna. Se establece un equilibrio entre el soluto adsorbido en la fase estacionaria y el disolvente eluyente que fluye por la columna. Debido a que cada uno de los componentes de una mezcla establecerá interacciones diferentes con la fase estacionaria y la móvil, serán transportados a diferentes velocidades y se conseguirá su separación. 

Desafortunadamente, no pude grabar el proceso de nuestra práctica, sin embargo, al principio de esta entrada está el link de la planeación, así que solo lo tengo por escrito. De cualquier forma, les dejo una foto de nuestro resultado final: 

Se puede apreciar el recorrido del compuesto

En cuanto a nuestros resultados:

CROMATOGRAFÍA DE CAPA FINA

Los recorridos del compuesto en cada disolvente

Calculado el Factor de partición

Distancia del compuesto	Distancia del disolvente	Fp= d compuesto/d disolvente
5.8cm	Hexano + cloroformo 6.6cm	.87cm
5.6cm	Etanol + cloroformo 6.2cm	9.0cm
7.2cm	Etanol + acetona 4.6 cm	1.5cm
7cm	Acetona + cloroformo 6.8cm	1.02cm
2cm	Acetona 9cm	.22cm
8cm	Hexano 9cm	.88cm
8cm	Cloroformo 8.5cm	.94cm
6.7cm	Etanol 7.8cm	.85cm

El mejor disolvente es el cloroformo y el menos eficiente, es la acetona.

CROMATOGRAFÍA DE COLUMNA

Compuesto: Recorrió 2.8cm

Solución: 5cm

Fp= 2.8cm/5cm = .56 cm

*El etanol es un buen disolvente.

Espero que la información compartida sea de su agrado, buen día. :)

PLANEACIÓN DE CROMATOGRAFÍAS

(13-oct-2014)

En estos días se estuvo viendo sobre los métodos de separación de mezclas, en este caso, planeamos la cromatografía de capa fina y de columna. La cromatografía tiene 2 fases: móvil y estacionaria.

Cromatografía de capa fina

Materiales:

• 1 pliego de papel filtro
• 5 frascos con tapa
• Pipeta pasteur
• Tubo de ensaye
• Mortero con pistilo
• Espinaca
• Acetona, cloroformo, etanol y hexano.
• Embudo de entalle delgado.

Procedimiento

1. Se preparan disoluciones proporcionales de 2:2 es decir, 2ml de x sustancias + 2ml de y sustancia. (Acetona+cloroformo, etanol+cloroformo, hexano+cloroformo y etanol+acetona). Cada disolución se vierte en un frasco correspondiente y se tapa, para evitar que se evaporen las sustancias. De igual manera habrán cuatro frascos con cada sustancia sin mezclar.
2. Se tritura un poco la espinaca en el mortero, después se le agregan 4ml de hexano y 2ml de etanol (se obtendrá clorofila y carotenoides).
3. Luego se termina de triturar ,la espinaca, se obtiene una fase orgánica (el líquido verde que es la clorofila). Se vierte la fase en el tubo de ensaye con ayuda del embudo. Se tapa el tubo y se deja reposar 3min.
4. Observar y agregar de 1 a 2g de sulfato de sodio (Na2SO4), agitar y volver a dejar reposar durante 3min.
5. Succionar la muestra con la pipeta pasteur y poner una gota en 8 tiras de papel filtro, a 1cm aproximadamente del extremo.
6. Colocar las tiras en cada frasco. Dejar reposar hasta observar la cromatografía.

*El mejor disolvente es donde se muestra la mayor cantidad de colores en la cual la muestra haya recorrido.

*El factor de partición es la distancia recorrida por el compuesto, dividido entre la distancia recorrida por el disolvente. Si el Fp>.5, entonces, es un buen disolvente.

Cromatografía de columna

Materiales:

• Jeringa de 5ml
• Espinaca
• Hexano
• Pipeta pasteur
• Mortero con pistilo
• Sílica gel

Procedimiento:

1. Al igual que en la de columna, se tritura la hoja. Se le agregan 4ml de hexano, y se vuelve a triturar hasta obtener la fase orgánica.
2. Después a la jeringa se le quita la aguja, y se le coloca un pedazo de algodón para tapar la entrada de la aguja. Se le agrega sílica gel y después la fase orgánica.
3. Una vez hecho  esto, se le agrega etanol y se tapa la jeringa con otro pedazo de algodón. Se deja reposar y luego se observan las columnas cromatográficas.

PRÁCTICA DE DESTILACIÓN Y SUBLIMACIÓN

(10-oct-2014)

El día 10 de octubre, realizamos la destilación y la sublimación previamente planeadas (Prácticas).

Les dejo a continuación el video de nuestra práctica, así como los resultados que obtuvimos:

Destilación y sublimación

Estos fueron nuestros resultados:

Sustancias	Tiempo en destilarse
Alcohol	6 min y 17 s
Agua	10min y 17 s

La prueba de que lo que recuperamos fue realmente alcohol (recuperamos 5ml):

En cuanto a la sublimación:

En el proceso de la sublimación, pudimos apreciar distintos cambios en la pastilla del baño. Primero pasó a estado gaseoso y debajo de la cápsula, se formaron cristales, después, se veía como salía el humo por la boca del vaso de precipitado, pasado un tiempo, se condensó, lo curioso es que el agua caía desde en medio como un pequeño chorro, no desde diversos puntos de la cápsula.

Espero que la información presentada sea de mucho apoyo para ustedes. :)